莱特 CX2-UVBGY-E 四色电动荧光模块配套奥林巴斯 CX23 抗核抗体谱(ANA IIF)免疫荧光检测整体解决方案
一、方案概述
间接免疫荧光法(IIF-HEp-2)是临床抗核抗体 ANA 筛查的金标准,依靠 FITC 标记二抗产生苹果绿色荧光判读核型与滴度,常搭配 DAPI 紫外复染定位全部细胞核,实现阴性 / 阳性*区分。
本方案依托奥林巴斯 CX23 生物显微镜 + 莱特 CX2-UVBGY-E 四色电动 LED 荧光模块搭建标准化 ANA 荧光阅片平台,匹配 ANA 检测两大核心荧光通道:UV(DAPI 紫外通道)、B(FITC 蓝光激发通道),同时预留 G/TRITC、Y/mCherry 扩展通道,满足自身抗体多标记联合检测需求。
整套方案摒弃传统汞灯光源,采用大功率 LED 一体化激发模组,无需预热、寿命 30000 小时,电动一键切换通道、光强记忆,适配医院风湿免疫科、检验科大批量 ANA 标本常态化阅片,解决传统荧光显微镜预热久、光源损耗快、通道切换繁琐、荧光背景杂乱等痛点。
二、方案提供企业:广州市莱特光电技术有限公司介绍
(一)企业基础概况
广州市莱特光电技术有限公司( LAITE 莱特)坐落于广州南沙,是专注 LED 荧光光源、显微镜荧光升级附件研发生产的*厂商,具备配套医学检验设备供应能力,产品适配奥林巴斯 CX23 等主流显微镜机型,广泛服务各级医院检验科、第三方医检所、生物制药实验室。
(二)核心技术与产品优势
1. 一体化多通道电动 LED 荧光模组技术
CX2-UVBGY-E 为适配奥林巴斯 CX23 定制开发,集成 LED 光源、滤光片组、电动切换机构、智能控制系统一体成型,配备主动循环风冷散热,杜绝长时间阅片波长漂移、光衰问题;配套多规格*滤光片,有效消除荧光串色,适配 ANA 检测 DAPI、FITC 核心染料。
2. 临床检验场景专项优化
针对 ANA、ANCA、AMA 等自身抗体荧光阅片优化操作逻辑,支持通道一键切换、独立光强记忆、软件联动图像采集,满足实验室室内质控、图像存档标准化要求。
3. 低成本存量设备升级方案
无需更换奥林巴斯 CX23 主机,仅加装荧光模块即可实现荧光功能改造,大幅降低科室设备采购投入;LED 光源使用寿命>30000 小时,免频繁更换汞灯,长期运维成本更低。
(三)全流程配套服务
售前可免费提供光路适配评估、按需定制激发块组合;交付提供上门安装、质控片校准、操作人员实操培训;售后 48 小时技术响应,提供整机质保、原厂配件更换、定期设备维护指导,支持 LIS、荧光图像软件联动定制开发。
三、方案核心硬件配置与适配原理
(一)硬件组成
1. 主机:奥林巴斯 CX23 正置生物显微镜(明场 + 荧光双模式)
2. 荧光附件:莱特 CX2-UVBGY-E 电动四色 LED 荧光模块(广州市莱特光电生产)
3. ANA 检测核心激发块参数
| 通道 | 激发滤光片 | 发射滤光片 | 对应染料 | ANA 检测作用 |
|----|----|----|----|----|
|UV 紫外通道 | 360/45nm|410nm 长通 | DAPI | 复染全部细胞核,蓝色荧光,定位细胞轮廓 |
|B 蓝色激发通道 | 470/35nm|525/45nm|FITC|ANA 特异性信号,苹果绿色荧光,判读核型、滴度 |
4. 配套配件:1.44 英寸智能操作控制器、DC12V 电源、40× 平场物镜、载物台、封片耗材
(二)模块适配 ANA 检测核心优势
1. 双通道独立光路,荧光成像纯净无串色
UV、B 通道独立光路搭配高品质带通滤光片,FITC 绿色特异性信号清晰,DAPI 蓝色核衬染均匀,均质型、斑点型、核仁型等各类 ANA 荧光核型辨识度显著提升。
2. 长寿命 LED 冷光源,适配大批量连续阅片
大功率 LED 搭配低噪循环散热风扇,开机即使用,无需预热;光源使用寿命 30000 小时,减少耗材更换与停机维护。
3. 电动智能操控,保障判读标准化
设备搭载 1.44 英寸彩色大屏控制器,单指旋钮即可完成通道切换、光强调节,各通道亮度独立记忆,批量检测无需反复调光,统一光照条件减少人为判读误差。
4. 安装便捷、拓展性强
燕尾卡槽直装 CX23 机身,不改动原有光学结构;预留 G(TRITC)、Y(mCherry)双通道,可拓展多指标联合荧光检测,一机多用。
四、ANA IIF 检测完整操作流程(分标本前处理、仪器调试、荧光阅片、设备收尾四大环节)
环节 1:标本实验室前处理(HEp-2 基质间接免疫荧光反应)
遵循《间接免疫荧光法用于抗核抗体实验室检测的*共识》标准化操作
1. 试剂与样本平衡
患者血清、HEp-2 抗原片、FITC 标记抗人 IgG 二抗、PBS 洗涤缓冲液室温平衡 18–25℃,配制 pH7.2–7.4 洗涤缓冲液;每批次同步设置阳性、阴性质控片。
2. 一抗孵育(血清结合)
取出 HEp-2 玻片,每孔滴加 25μL 梯度稀释患者血清(初筛 1:100,阳性标本梯度稀释测滴度),湿盒室温避光孵育 30min;避免液体溢出、气泡损伤细胞基质。
3. 洗涤去除游离血清
倾斜玻片,PBS 轻柔冲洗,浸泡洗涤 5min,更换缓冲液重复洗涤 1 次;吸水纸轻吸玻片边缘液体,禁止擦拭细胞观测区域。
4. 二抗孵育(FITC 荧光标记)
每孔滴加 FITC 标记抗人 IgG 荧光二抗,避光湿盒孵育 30min;重复洗涤流程,去除未结合游离二抗。
5. 封片制备待阅玻片
每孔滴加封片剂,加盖盖玻片,规避气泡;封片后尽快上机观测,防止荧光淬灭。
环节 2:莱特 CX2-UVBGY-E 荧光模块仪器开机调试
1. 硬件安装检查
确认 CX2-UVBGY-E 荧光模块燕尾卡槽锁紧于 CX23 机身,接通 DC12V 电源,控制器屏幕正常点亮;物镜切换至 20× 低倍物镜,载物台居中归零。
2. 开机与通道参数设置
① 模块一键开机,无需预热;大屏同步显示 BF 明场、DAPI(UV)、FITC(B)、TRITC(G)各通道状态;
② 旋钮切换至B 通道(FITC),光强调节至 50%–70% 并长按保存记忆;再切换UV 通道(DAPI),调节适配亮度独立存储;
③ 切换明场模式校准视野清晰度,确认光路无遮挡、光斑均匀无暗角。
3. 质控片预读校准
放入 ANA 阳性质控片,20× 物镜切换 B 通道,细胞核可见明亮苹果绿色荧光;切换 UV 通道,全部细胞核均匀蓝色衬染;阴性质控片仅存在 DAPI 蓝色核染色,无特异性绿色荧光,校准无误后方可检测临床标本。
环节 3:荧光阅片判读标准操作(核心双通道切换流程)
1. 低倍镜初筛阴阳性(20× 物镜,优先 B 通道)
待检玻片放置载物台,开启 FITC(B)通道扫描全孔细胞:
• 细胞核无苹果绿色荧光:判定 ANA 阴性;
• 细胞核出现特异性绿色荧光:判定阳性,记录初筛稀释度,切换 40× 高倍镜区分荧光核型。
2. 高倍镜核型分型(40× 物镜,UV+B 双通道交替观测)
① 保持 B 通道,依据绿色荧光分布区分均质型、斑点型、核仁型、胞浆型、着丝点型等标准 ANA 核型;
② 一键切换 UV 通道,DAPI 蓝色荧光完整勾勒细胞核轮廓,辅助区分特异性核内荧光与非特异性背景干扰;
③ 双通道交替观测并截图留存荧光图像,用于双人复核、电子报告存档。
3. 滴度梯度判读
依次观测梯度稀释标本,记录可清晰观测到特异性绿色荧光的*血清稀释倍数,作为 ANA *终报告滴度(1:100、1:320、1:1000 等)。
4. 批量标本连续阅片
更换标本无需重新调节光强,模块自动调取各通道记忆亮度,仅微调物镜焦距即可,大幅提升批量检测效率。
环节 4:检测结束设备收尾与日常维护
1. 全部标本阅片完成后,旋钮将光强归零,关闭荧光模块电源与 CX23 显微镜;LED 光源无强制冷却等待,可直接关机。
2. 无尘布擦拭载物台、物镜表面,清除封片剂、缓冲液残留,避免腐蚀光学镜片。
3. 每周清理模块散热风扇滤网,保障散热稳定,延长 LED 光源使用寿命。
4. 按月记录光源累计使用时长,光源衰减后可单独更换灯珠,莱特光电提供原厂配件维保,无需整体更换模块。
五、方案临床应用价值
1. 检测结果标准化,降低人为判读误差
UV+B 双通道标准化激发参数统一观测亮度,DAPI 衬染避免细胞漏判,各类 ANA 荧光核型区分清晰,满足内质控、室间质评规范要求;整套设备由莱特光电统一光路校准,保障多批次、多操作人员检测一致性。
2. 降低检验科长期运营成本
LED 光源替代传统汞灯,省去频繁更换耗材、长时间预热的人力与物料支出;依托莱特存量显微镜升级方案,复用原有奥林巴斯 CX23 主机,设备采购投入大幅降低。
3. 适配医院大批量临床检测场景
一键切换通道、光强记忆、即开即用等功能缩短单张玻片阅片时长,适配门诊、住大批量 ANA 标本集中筛查;简易旋钮操作降低新人上手门槛。
4. 一机多用,拓展检测项目
除 ANA 常规筛查外,G、Y 通道可拓展开展 ANCA、AMA 等多指标联合荧光检测,莱特光电支持后期增配激发块、软件联动升级,一套设备覆盖风湿免疫全套荧光检验项目。
六、方案结
莱特 CX2-UVBGY-E 四色电动 LED 荧光模块搭配奥林巴斯 CX23 显微镜,是基层医院、综合检验科开展 ANA 间接免疫荧光检测的高标准化解决方案,整套系统由广州市莱特光电技术有限公司研发、生产,并提供安装、培训、售后全流程技术支撑。
方案 UV(DAPI)、B(FITC)双核心荧光通道匹配 ANA IIF 检测原理,依托长寿命 LED 光源、电动智能操控、高信噪比荧光成像等核心优势,从企业技术支撑、硬件配置、标本前处理、仪器双通道阅片到设备日常维护形成闭环标准化操作流程,在保障 ANA 检测灵敏度、核型分型准确性的前提下,简化操作流程、压缩运维成本,为自身免疫性疾病抗核抗体筛查提供稳定、高效、合规的临床荧光检测平台。
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