显色淡，灵敏度偏低 
1、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高；所以尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温。
2、试剂盒未充分平衡；所以试剂盒从2～8℃冰箱取出后打开盒盖，于室温平衡至少20分钟，确保所有试剂已平衡至室温（约25℃）。 
3、培养箱温度不足37℃，应注意培养箱温度，放入反应板后尽量减少开启次数以免影响温度恒定，非隔水式培养箱尤其应注意。 
4、保温时间不足；所以做实验时一定注意时间的重要性，如果怕忘了时间，可以校正定时钟准确定时。 
5、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增加；按说明书要求保留洗涤时间，准确记住洗涤次数 。
6、移液器吸液量不足，吸嘴内壁挂水太多或内壁不清洁；所以保证校正移液器，吸嘴要配套，装吸嘴时要紧密，吸嘴内壁要清洁，*一次性使用。 
7、蒸馏水，水质有问题，要使用新鲜合格的蒸馏水。