TissueFAXS Spectra 助力发掘胃癌发生关键临界点
胃癌（GC）是全球第五大常见恶性肿瘤，也是全球癌症相关死亡的第三大原因，其特点是其复杂性，涉及多个阶段和多种病因。尽管在了解这些癌前病变的组织病理学特征和分子基础方面取得了实质性进展，但仍然严重缺乏预防或逆转这些疾病的临床有效策略，这突出了早期干预和预防方面的关键和持续差距。
2025 年 9 月，复旦大学附属中山医院（内镜中心、内镜研究所）和中山大学（生命科学学 进化合成生物学创新中心）在Signal Transduction and Targeted Therapy发表题为“Spatiotemporal multi-omics analysis uncovers NADdependent immunosuppressive niche triggering early gastric cancer”文章，IF：52.7。本研究构建了早期胃癌时空多组学图谱，揭示了NAD + 代谢驱动的免疫抑制微环境（由 NAMPT 和 AREG 信号介导），是触发胃癌发生的关键临界点。
本研究发现，用ESD标本固有的空间连续性——在个体微环境中绘制从正常粘膜到IM再到EGC的分子进化图。这一策略解决了长期以来阻碍该领域发展的患者间异质性的挑战，实现了*个统一的人类胃癌发生图谱的构建。通过人工智能整合的空间多组学，确定了PMC_P小生境——一种新的致癌引爆点，在空间上邻近肿瘤——由炎性干细胞样PMC亚群驱动。这个小生境协调巨噬细胞-上皮细胞和上皮-成纤维细胞串扰，共同引发致瘤性转化。巨噬细胞浸润是早期肿瘤形成的一个已知标志，AREG可由巨噬细胞表达，并在上皮重塑和肿瘤发生中发挥关键作用。与其经典的抗肿瘤作用相反，PMC_2小生境中的VEGFA + M1巨噬细胞矛盾地通过AREG驱动早期胃癌发生。EGFR/ERBB2信号，促进免疫抑制微环境，使基质重塑和血管生成。使用FK866对NAMPT进行药物抑制晚期恶性肿瘤的II期试验中减弱了临床前模型中的EGC发展，表明其具有拦截恶性转化的潜力。
实验部分：
TissueFAXS系统(TissueFAXS Spectra)对载玻片进行全景多光谱扫描，进行mIHC荧光信号定量。然后，将数据导入StrataQuest分析软件进行分析：
1. 图像采集：利用TissueFAXS系统，对临床样本（组织芯片TMA、异种移植肿瘤组织）的IHC和H&E染色切片进行图像捕获，确保图像质量稳定且可追溯。
2. 定量分析：StrataQuest软件DAPI通道用于识别有效核。以有效核为核心，根据每个蛋白质通道的染色情况设定距离半径，找到蛋白质荧光染色信号。然后根据每个通道的染色情况设置阈值，划分阳性细胞群体，并对阳性细胞进行计数。三阳性细胞(A+B+C+)被定义为同时表达三种靶蛋白(例如，蛋白A、B和C)的细胞群体。StrataQuest软件自动计算每个象限中的细胞数量，并计算三重阳性细胞在细胞群中的比例。。
3. 结果验证：在验证DAPI/CK/ITGA2及PMC 2标记(CK/ITGA2)在这些人群中的空间分布、ITGA2在癌旁区域的表达水平、基因（AREG、EGFR和ERBB2）在PMC_P中的过表达以及AREG+细胞和HER2 + EGFR+细胞共定位、基因（NAMP、ITGA5和ITGB1）在PMC_P中过度表达以及ITGB1 + ITGA5+细胞和NAMPT+细胞共定位时空多组学分析揭示NAD依赖性等关键实验中，该技术的定量分析结果成为结论的重要支撑。
Figure 4 癌前PMC_P小生境协调PMC_2积累和PD-L1介导的免疫抑制。通过免疫荧光双标记(DAPI/CK/ITGA2)，PMC_2标记(CK/ITGA2)在这些人群中的空间分布，结果表明PMC_2细胞在PMC_P区的富集，说明它们从癌前微环境开始扩增。定量分析进一步证实了PMC_2比例在不同进展阶段呈梯度增加21例EGC患者中ITGA2的表达显示，ITGA2在癌旁区域的表达水平明显高于其他区域。
Figure 5 确定EGC启动过程中的关键细胞群和CCC机制。
Figure 6 PMC_2与PMC_P内的成纤维细胞和巨噬细胞相互作用。
