麻痹性贝类毒素(PSP)ELISA试剂盒说明书

麻痹性贝类毒素(PSP)ELISA试剂盒

使用说明书

（货号：OunuoAT91004）

麻痹性贝类毒素（石房蛤毒素）检测试剂盒,本品采用竞争性酶联免疫检测技术，用于样本中PSP毒素的定量分析，可满足96次测试，在做复孔的情况下，一次*多可检测43个样本。

1．概述

本检测采用酶联免疫量检测麻痹性贝类毒素的存在。神经性贝毒是一种毒素，石房蛤毒素是麻痹性贝类毒素的一种。本检测可用于水产样本对贝类毒素的定性和定量检测，例如甲壳类动物的样本。对于甲壳类动物的需要提前制备样本。如果条件允许，阳性样本可以做HPLC，GC/MS或其他方法确认。

2．安全性说明

标准品溶液含有少量的石房蛤毒素。底物溶液含有四甲基联*，终止液还有稀硫酸。避免皮肤与粘膜与终止液接触。若终止液与皮肤接触，可用水洗去。

3．贮藏与稳定性

试剂盒贮存在4-8°C。使用前试剂盒中溶液要恢复到室温（20—25度）。在保质期内试剂盒都可以正常使用。

4．检测原理

本实验采用直接竞争ELISA方法，用特异性抗体识别石房蛤毒素。样本中的石房蛤毒素可与石房蛤毒素-酶结合物竞争，同包被在微孔板上的兔抗-石房蛤毒素抗体结合。石房蛤毒素抗体与包被在微孔底部的二抗结合。洗板后加入底物溶液，显蓝色。蓝色的深度与石房蛤毒素在样本中的浓度成反比。颜色反应在规定时间内终止，颜色用酶标仪读值。每孔的样本浓度值可以通过标准曲线来读取。

5. 检测步骤

(1) 移取 50μL 标准品至相应微孔中；

(2) 移取 50μL 样本待测液至相应微孔中；

(3) 移取 50μL 酶结合物至所有微孔中；

(4) 加入 50μL 抗体至每一所需微孔中，用手指肚轻轻敲击微孔板架两侧混匀 1min；

(5) 室温（20-25℃）孵育 30min；

(6) 甩干微孔板，加入 300μL 洗液（1×），浸泡 5s 后倒出洗液，再重复 4 次，甩干并于无尘布上 拍干；

(7) 加入 100μL 底物，室温（20-25℃）避光孵育 10-15min，注意观察以防吸光度值过高；

(8) 加入 100μL 终止液，于 450/630nm 下读数。

6．试剂盒局限性和可能的干扰

样本中经常存在的大量的无机物和有机物经检测，并未为发现影响试剂盒的检测结果。然而，由于样本中发现有易变质的混合物，由它们引起的基质反应不可避免地会影响检测结果。操作失误也可能造成实验错误。如：贮存的问题。加样次序错误，加入溶液的体积错误，孵育的时间过长或者过短，影响免疫反应或者底物反应，实验过程中温度过低或者过高（低于10℃，大于30℃）。本试剂盒提供筛查神经性贝毒的筛查结果。阳性样本可采取其他的分析方法（GC,HPLC，其他方法）证明。

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