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细胞冻存详述

来源: 上海博湖生物科技有限公司 >> 进入该公司展台 2023/05/06 14:42:59 已浏览:
导读:细胞冻存详述

细胞冻存的基本原理: 慢冻

手动降温:将细胞依序放在4℃(30分钟)、-20℃(1小时)、-80℃(*)后移至液氮中保存。

程序降温盒:是一般*广泛使用的降温法,为一种特制冷冻容器(填充异丙醇或依靠特制金属导热),使细胞以每分钟约-1℃的速度降至-80℃(*),然后移至液氮中保存。


大家可以根据自身情况或者实验条件选择不同的冻存方式。


细胞冻存是细胞保存的主要方法。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。


细胞代谢过程需要各种蛋白酶的参与,而这些蛋白酶在环境温度低于-70℃时会集体罢工,低温贮藏的目的是通过低温使代谢活动近乎停止。细胞因此进入休眠状态,使细胞“不会老”,可以长期保存。


因为冻融过程对所有细胞和组织都是有一定伤害的,因此,需要开发出有效的技术来防止细胞死亡和损伤。


这时,低温保护剂就发挥出它的作用了。


低温保护剂可保护细胞不受细胞内冰冻影响,目前多采用DMSO、甘油、*和丙二醇等渗透型低温保护剂。它们的作用机制包括:自由进入细胞,取代水,使冰点下降,充当盐的二次溶剂,提高细胞膜对水的通透性。


但是,部分低温保护剂在缓慢冷冻过程中虽然会保护细胞,但它们也会引起细胞毒性,尤其是在室温下。因此,在标准的自制冻存液中,会含有血清,血清是用来降低细胞毒性的,但血清也不是*的。



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