PCR反应鉴定-PCR反应条件:
循环步骤
温度
时间
循环数
预变性
94℃
5 min
1
变性
10 sec
30-40
退火
50-65℃
20 sec
延伸
72℃
30 sec/ kb
参数规格: 产品名称:禽腺病毒C型荧光定量PCR检测试剂盒 产品货号:XG-01P726 产品规格:50次 产品分类:PCR检测试剂盒 产品运输:低温运输 产品保存:-20℃保存 产品有效期:一年 产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。产品仅可用于科研
它具有下列特点: 1. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右,不需要额外地在洗柱液中补加乙醇。 2. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的单拷贝的基因。 3. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。 4. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。 5. 价廉物美,远低于国外同类产品。 6. 适用于各种材料,包括花生油、色拉油、酱油、菜籽油等样品。 运输及保存 常温运输和和保存,有效期一年 自备试剂 样品 1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.2 mL 液体植物油样品。 2. 加入 0.6 mL 溶液 A,室温振荡 3-5 分钟。注意:在 4℃保存的溶液 A 会形成沉淀,用前需要加热到 65℃使之溶化。 3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。注意:不能只取水相。 4. 12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。 5. 加入 0.8 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。 6. 12,000-15,000 g 室温离心半分钟。 7. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-50 uL DNA 洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中,室温放置 2 分钟。 8. 12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,离心管中收集的样品即为植物油 DNA。 9. DNA 样品可以直接用于 PCR,也可放-20℃长期保存。
技术原理: DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。 在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性) 发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。 小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP去甲维拉帕米盐酸盐Norverapamil, 质量规格:美国进口
A10细胞,大鼠主动脉血管平滑肌细胞 CCL13张氏肝细胞正常,Chang liver细胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮样干细胞)5×106cells/瓶×2霉酚酸内酯 (EP 杂质H)Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)质量规格:美国进口
仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid质量规格:美国进口
RELT Others Human 人 RELT / TNFRSF19L 人细胞裂解液 (阳性对照) 霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
肾动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside质量规格:美国进口
HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2司盘85shēng huà shì jì容量:1克
hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人类外周血CD14+单核细胞团块单一来源,预选型 > 1 mio.cells 人脊髓星形胶质细胞RNAHA-sp miRNA5 μg蔗糖酶 Invertase 9001-57-4 250MG 通用试剂
CM-M010小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL异数李速 Isorhcmnqtin 480-19-3
KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Theophylline1,3-二甲基2KU高,98%
肾系膜细胞培养基MCM555-06-6对基本钠4-AMINOBENZOIC ACID wo7ium SALT
禽腺病毒C型荧光定量PCR检测试剂盒BT-549(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎儿*成纤维细胞完全培养基100mL 人结直肠腺癌细胞;LoVo皮质甾酮,英文名或英文缩写:Corticosterone,级别:CP,99%,规格:100克
EB病毒转化的绒猴细胞;B95-8醋锑 cntimony triccqtctq 693-2-0
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) PROTEASEINHIBITORCOCKTAIL,BACTERIAL蛋白酶抑制剂混合物,细菌蛋白组学级白色粉末FROZENsigma
CL-0209SHZ-88(大鼠癌细胞)5×106cells/瓶×2偏硼酸,英文名或英文缩写: borate monohydrate,级别:BR,98%,规格:500克
3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 小鼠肝癌细胞,HEPA1-6细胞 FO(瘤细胞)AMVReverseTranase 300u/1000u Promega原装 组成及试剂配制 1、酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。
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PCR反应鉴定-PCR反应条件:
循环步骤
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时间
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预变性
94℃
5 min
1
变性
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10 sec
30-40
退火
50-65℃
20 sec
30-40
延伸
72℃
30 sec/ kb
30-40
参数规格:
产品名称:禽腺病毒C型荧光定量PCR检测试剂盒
产品货号:XG-01P726
产品规格:50次
产品分类:PCR检测试剂盒
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏荧光定量 PCR 产品。产品仅可用于科研
它具有下列特点:
1. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右,不需要额外地在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的单拷贝的基因。
3. 安全无毒,不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
4. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。
5. 价廉物美,远低于国外同类产品。
6. 适用于各种材料,包括花生油、色拉油、酱油、菜籽油等样品。
运输及保存 常温运输和和保存,有效期一年
自备试剂 样品
1. 在 1.5 mL 离心管中加入 0.2 mL 液体植物油样品。
2. 加入 0.6 mL 溶液 A,室温振荡 3-5 分钟。注意:在 4℃保存的溶液 A 会形成沉淀,用前需要加热到 65℃使之溶化。
3. 将溶液全部转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。注意:不能只取水相。
4. 12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
5. 加入 0.8 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,弃收集管中穿透液。
6. 12,000-15,000 g 室温离心半分钟。
7. 在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-50 uL DNA 洗脱液,然后将离心吸附柱套入一新的 1.5 mL 离心管中,室温放置 2 分钟。
8. 12,000-15,000 g 室温离心 1 分钟,离心管中收集的样品即为植物油 DNA。
9. DNA 样品可以直接用于 PCR,也可放-20℃长期保存。
技术原理:
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP去甲维拉帕米盐酸盐Norverapamil, 质量规格:美国进口
A10细胞,大鼠主动脉血管平滑肌细胞 CCL13张氏肝细胞正常,Chang liver细胞 CL-0080WB-F344(大鼠肝上皮样干细胞)5×106cells/瓶×2霉酚酸内酯 (EP 杂质H)Mycophenolic Acid Lactone (EP Impurity H)质量规格:美国进口
仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1O-去甲基霉酚酸O-Desmethyl Mycophenolic Acid质量规格:美国进口
RELT Others Human 人 RELT / TNFRSF19L 人细胞裂解液 (阳性对照) 霉酚酸-d3 β-D-葡萄糖苷酸Mycophenolic Acid-d3 β-D-Glucuronide质量规格:美国进口
肾动脉内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)霉酚酸酰基 β-D-葡萄糖苷Mycophenolic Acid Acyl-β-D-glucoside质量规格:美国进口
HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2司盘85shēng huà shì jì容量:1克
hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人类外周血CD14+单核细胞团块单一来源,预选型 > 1 mio.cells 人脊髓星形胶质细胞RNAHA-sp miRNA5 μg蔗糖酶 Invertase 9001-57-4 250MG 通用试剂
CM-M010小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL异数李速 Isorhcmnqtin 480-19-3
KIAA1279 Others Human 人 KIAA1279 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Theophylline1,3-二甲基2KU高,98%
肾系膜细胞培养基MCM555-06-6对基本钠4-AMINOBENZOIC ACID wo7ium SALT
禽腺病毒C型荧光定量PCR检测试剂盒BT-549(人管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M093小鼠胎儿*成纤维细胞完全培养基100mL 人结直肠腺癌细胞;LoVo皮质甾酮,英文名或英文缩写:Corticosterone,级别:CP,99%,规格:100克
EB病毒转化的绒猴细胞;B95-8醋锑 cntimony triccqtctq 693-2-0
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) PROTEASEINHIBITORCOCKTAIL,BACTERIAL蛋白酶抑制剂混合物,细菌蛋白组学级白色粉末FROZENsigma
CL-0209SHZ-88(大鼠癌细胞)5×106cells/瓶×2偏硼酸,英文名或英文缩写: borate monohydrate,级别:BR,98%,规格:500克
3T3-L1, 小鼠前脂肪细胞 小鼠肝癌细胞,HEPA1-6细胞 FO(瘤细胞)AMVReverseTranase 300u/1000u Promega 原装
组成及试剂配制
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。