绿都猪瘟一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书20次 云南昆明动物疫病PC...

价格
¥2,800.00

型号
20T

品牌

所在地
云南省 昆明市

更新时间
2024-01-09 01:08:01

浏览次数

    昆明诺金科技有限公司生产销售绿都猪瘟一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次) 云南昆明动物疫病PCR荧光定量检测试剂盒  绿都生物动物疫病PCR试剂盒  绿都生物动物疫病PCR试剂盒 养殖场屠宰场动物疫病检测试剂盒厂家


    诺金猪流行性腹泻病毒一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次) 绿都生物动物疫病PCR试剂盒

    猪瘟一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次)

    【注意】接到货后请认真阅读注意事项。

    【用途】用于猪瘟病毒病的检测、诊断和流行病学调查。

    【试剂】     

    编号

    数量

    保存

    SR-I

    8mL

    4

    SR-II

    14mL

    4

    TU-1

    250uL

    -20

    TU-2

    20uL

    -20

    TU-3

    20uL

    -20

    TU-4

    20uL

    -20

    TU-5

    500uL

    -20

    TU-6

    60uL

    -20

    TU-7

    25uL

    4

    TU-8

    30uL

    4

    T

    500 uL

    -20

    绿都猪瘟一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次) 云南昆明动物疫病PCR荧光定量检测试剂盒

    【操作步骤】

    1.RNA提取  

    (1) 取疑似猪瘟的病料(肾脏、淋巴结、脾脏、扁桃体)1~4g于无菌研钵,研磨并用Hanks液或PBS稀释成14乳剂,分装1.5ml灭菌EP管,反复冻融2~3次,8000r/min离心5分钟。

    (2)200uL上清液或标准品T,移入新的1.5mL灭菌EP管中,加入400uLSR-I,反复颠倒几次混匀,室温放置5~10分钟。

    (3)加入200uL氯仿,漩涡振荡15秒混匀。室温下放置2~3分钟。

    (4)12000r/min离心10分钟,取上层水相(注意:切勿吸取到里两相之间的杂质),转移到一个新的EP管中,再加入等体积异丙醇混匀,室温放置10分钟。

    (5)12000r/min离心10分钟,弃去上清,加入SR-II 700uL,充分洗涤沉淀RNA后,12000r/min离心5分钟,小心吸去上清(注意:严格防止RNA丢失)。

    (6)用洁净吸水纸吸干管壁的SR-II,室温放置2~3分钟。用20uLTU-5溶解,即为模板,即用或-70冻存备用。

    2.One-Step RT- PCR加样体系

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    3.反应程序

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    4.电泳

    称量0.25g琼脂糖,放入锥形瓶,加入25mL 1×TAE液(可配置50×浓缩液,储存备用),于微波炉中熔解,加入1.5uLTU-8混匀。封闭好电泳槽,加入梳子,倒入琼脂凝胶,待凝固后,将PCR产物5uL混合1uL TU-7,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3uLTU-6,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。

    【结果判定】

        在约510bp位置出现扩增带,实验结果为阳性(如图)。                              

                                      1.DL2000 Marker      

                                      2.标准阳性片段

    绿都猪瘟一步法RT-PCR诊断试剂盒说明书(20次) 云南昆明动物疫病PCR荧光定量检测试剂盒

    【注意事项】

    1.每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。

    2.本试剂盒为20头份量诊断试剂,操作失误或移液器不准确造成终剂量不够情况,不予负责。

    3.所有试剂在要求温度下保存,-20℃保存试剂尽量减少反复冻融,使用后的试剂立即放回,避免在室温搁置太久。

    4.尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染,RNA抽提严格防止RNA酶污染,要求戴一次性塑料手套,并经常更换。

    5.加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不、定时不准确造成无结果情况,不予负责。

    6. 吸头、离心管和PCR管在使用前,好用DEPC水(0.1%)处理,然后高压灭菌后烘干,操作过程尽量不要用手接触,可用镊子夹取。

    7.注意防止试剂污染,在有效期限前用完。

    8. TU-8所装试剂为致癌物质,避免接触到皮肤。如若不甚接触,请立即用洗涤剂清洗。

    【保存期】

        本制品有效期为1年,生产日期见盒盖内侧。





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