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解析大鼠ELISA试剂盒实验结果颜色较淡原因

来源: 上海抚生实业有限公司 >> 进入该公司展台 2021/09/22 16:26:02 已浏览:
导读:解析大鼠ELISA试剂盒实验结果颜色较淡原因

在做完实验后,发现阳性对照、质控在内的有板孔颜色均较淡。这是原因造成的?我司技术整理后给出如下解析,邀您来看看!


容易造成的原因:


1.试剂盒必须在有效期内使用, 过有效期的产品可能会产生很弱的信号;


2.试剂盒没有按规定进行保存,受高温影响;


3.试剂、样品用前未平衡至室温;


4.加入试剂的体积和时间有误,移液器计量不准,吸嘴内水分太多或不清洁;


5.洗板及加样过程中,酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力;


6.孵育时间及孵育温度未达到要求 ,反应板放入培养箱时注意温度并及时调整;


7.洗板次数过多,或浓缩洗液稀释倍数不符合要求;洗涤冲击力太大。浸泡时间太长;


8.显色剂加量不足或顺序颠倒,或混合后加入;


9.底物作用时间不够;


10.蒸馏水水质有问题。


解决办法:


1.实验前检查试剂的组分及批号,确认试剂未过期;


2.不要将试剂盒长时间置于常温下,按使用规定储藏;


3.确定使用的试剂体积正确,加入时间适当;


4.校正移液器,移液器与吸嘴配合要紧密吻合。移液不宜太快,排放应完全;


5.确认盛酶标的容器不含酶抑制剂如叠氮钠等,确认配制洗液的容器已洗干净,确认配制洗液的纯化水达到要求且未受污染;


6.孵育温度应控制在 37-38℃,孵育时间严格按照说明书操作。保温期内不宜多开门,以免影响保温;


7.严格按说明书要求稀释浓缩洗液及洗板,减小洗涤冲击力,按说明书要求置留洗涤液时间和洗涤次数;


8.显色剂滴瓶垂直向下,持力均匀,滴速不宜过快,先加显色剂 A,后加显色剂B,不可将A、B液混合后加入;


9.准确定时;


10.测定蒸馏水配制试剂对酶免疫法的影响。

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