PCR实验方法步骤: 方法 1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl
服务流程:产品仅用于科研 接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
英文名称
规格
编号
恶臭假单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Pseudomonas putida
详见说明
AP96736
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
脱氧* 英文名称 3-Deoxyaconitine 分 子 量: 629.742 CAS NO.: 3175-95-9 纯 度: ≥98% 分子式: C34H47NO10 性状: 白色结晶 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
甜菊双糖苷 英文名称 Steviolbioside 分 子 量: 642.734 CAS NO.: 41093-60-1 纯 度: ≥98% 分子式: C32H50O13 性状: 白色结晶粉末 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
维生素B2 英文名称 Vitamin B2 分 子 量: 376.36 CAS NO.: 83-88-5 纯 度: ≥98% 分子式: C17H20N4O6 性状: 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
小鼠促上腺皮质激素 英文名称: Adrenocor Ticoopic Hormore 规格: 48T/96T 英文缩写: ACTH Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 98475-07-1 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0% 关键词:
小鼠促上皮质激素释放激素elisa试剂盒 小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒、小鼠促上皮质激素释放激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Epigoitrin 1072-93-1 中文名:表告依春 分子式:C5H7NOS
小鼠促上皮质激素释放激素(CRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名:N6-苯甲酰基腺嘌呤 分子式:C12H9N5O 度:98.0%
小鼠促卵泡素elisa试剂盒 小鼠促卵泡素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促卵泡素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促卵泡素试剂盒、小鼠促卵泡素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cyasterone 中文名:杯苋甾酮 分子式:C29H44O8 度:99.0%
小鼠促卵泡素(mouse FSH) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Fludarabine 21679-14-1 中文名:氟达拉宾 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 关键词:
恶臭假单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒Physaminimin C 中文名: 分子式:C28H38O8 大鼠补体片断5a(C5a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phyperunolide E 中文名: 分子式:C28H40O9 中文名称 方法 规格
Phyllostine 中文名: 分子式:C7H6O4 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phomaligol A 中文名: 分子式:C14H20O6 大鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phenytoin 中文名:苯妥英 分子式:C15H12N2O2 大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
使用方法 一、样品 DNA 的制备 1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。 2.如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个阳性对照和一个阴性对照。阳性对照是在 200μL 水中加 10μL PCR 阳性对照作为阳性对照,阴性对照是直接用 200μL 水作为阴性对照。提取结束后,*得到 200μL 模板 DNA(每个样品)放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否则PCR 抑制物很可能会抑制 PCR。二、PCR(60 μL 体系) 3.样品管:在 N+2 个PCR 管中加入下列成分:成分 N 个样品管 阴性对照 阳性对照PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL PCR 引物对 各 2 μL 2 μL 2 μL 样品 DNA 模板 各 18 μL - - 阳性对照(纯化后) - 18 μL - 阴性对照(纯化后) - - 18 μL电泳检测 4.取 10-20 μL PCR 产物直接进行琼脂糖凝胶电泳(本产品不需要单独加loading buffer),*使用 100 bp DNA Marker,如果样品为阳性,将会得到长度为 3582 bp 的扩增产物。 二反应的准备: 待各组份融化后先瞬时离心,然后轻弹混匀。按下表在已灭菌的PCR管中配制反应体系,每次实验需加一个阴性和一个阳性对照,测试反应管可以有多个。配制过程中应注意无菌,戴口罩,并注意避免操作产生的气溶胶造成样品间的交叉污染,在有风压的设备如净台或生物安全柜中进行操作。建议配制完毕后瞬时离心以使液体沉至管底。 三、PCR反应: 降落PCR法(Touchdown PCR):94℃变性2分钟;首循环:94℃变性30秒,68℃退火30秒,72℃延伸45秒;从第二到八个循环开始,每循环退火温度下降1℃,其余不变;从第九个循环开始,反应条件固定为:94℃变性30秒,60℃退火30秒,72℃延伸45秒,循环32次;循环结束后,在72℃延伸7分钟,保持在4℃。
其他推荐产品
首页| 关于我们| 联系我们| 友情链接| 广告服务| 会员服务| 付款方式| 意见反馈| 法律声明| 服务条款
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
服务流程:产品仅用于科研
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称
英文名称
规格
编号
恶臭假单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Pseudomonas putida
详见说明
AP96736
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
脱氧* 英文名称 3-Deoxyaconitine 分 子 量: 629.742 CAS NO.: 3175-95-9 纯 度: ≥98% 分子式: C34H47NO10 性状: 白色结晶 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
甜菊双糖苷 英文名称 Steviolbioside 分 子 量: 642.734 CAS NO.: 41093-60-1 纯 度: ≥98% 分子式: C32H50O13 性状: 白色结晶粉末 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
维生素B2 英文名称 Vitamin B2 分 子 量: 376.36 CAS NO.: 83-88-5 纯 度: ≥98% 分子式: C17H20N4O6 性状: 规格: 20mg/50mg/1g,可按客户需求包装! 用途: 用于科研研究、鉴定、药理实验等
小鼠促上腺皮质激素 英文名称: Adrenocor Ticoopic Hormore 规格: 48T/96T 英文缩写: ACTH Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 98475-07-1 中文名: 分子式:Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate 度:98.0% 关键词:
小鼠促上皮质激素释放激素elisa试剂盒 小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促上皮质激素释放激素试剂盒、小鼠促上皮质激素释放激素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Epigoitrin 1072-93-1 中文名:表告依春 分子式:C5H7NOS
小鼠促上皮质激素释放激素(CRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T N6-Benzoyladenine 4005-49-6 中文名:N6-苯甲酰基腺嘌呤 分子式:C12H9N5O 度:98.0%
小鼠促卵泡素elisa试剂盒 小鼠促卵泡素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠促卵泡素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠促卵泡素试剂盒、小鼠促卵泡素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Cyasterone 中文名:杯苋甾酮 分子式:C29H44O8 度:99.0%
小鼠促卵泡素(mouse FSH) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Fludarabine 21679-14-1 中文名:氟达拉宾 分子式:C10H12FN5O4 度:98.0% 关键词:
恶臭假单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒Physaminimin C 中文名: 分子式:C28H38O8 大鼠补体片断5a(C5a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phyperunolide E 中文名: 分子式:C28H40O9 中文名称 方法 规格
Phyllostine 中文名: 分子式:C7H6O4 大鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phomaligol A 中文名: 分子式:C14H20O6 大鼠补体蛋白3(C3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Phenytoin 中文名:苯妥英 分子式:C15H12N2O2 大鼠叠氮胸苷(AZT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
使用方法
一、样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒DNAout。
2.如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个阳性对照和一个阴性对照。阳性对照是在 200μL 水中加 10μL PCR 阳性对照作为阳性对照,阴性对照是直接用 200μL 水作为阴性对照。提取结束后,*得到 200μL 模板 DNA(每个样品)放冰上待用,溶解 DNA 沉淀的溶液不能少于 200μL,否则PCR 抑制物很可能会抑制 PCR。二、PCR(60 μL 体系)
3.样品管:在 N+2 个PCR 管中加入下列成分:成分 N 个样品管 阴性对照 阳性对照PCR MagicMix 3.0 各 20 μL 20 μL 20 μL PCR 引物对 各 2 μL 2 μL 2 μL 样品 DNA 模板 各 18 μL - - 阳性对照(纯化后) - 18 μL - 阴性对照(纯化后) - - 18 μL电泳检测
4.取 10-20 μL PCR 产物直接进行琼脂糖凝胶电泳(本产品不需要单独加loading buffer),*使用 100 bp DNA Marker,如果样品为阳性,将会得到长度为 3582 bp 的扩增产物。
二反应的准备:
待各组份融化后先瞬时离心,然后轻弹混匀。按下表在已灭菌的PCR管中配制反应体系,每次实验需加一个阴性和一个阳性对照,测试反应管可以有多个。配制过程中应注意无菌,戴口罩,并注意避免操作产生的气溶胶造成样品间的交叉污染,在有风压的设备如净台或生物安全柜中进行操作。建议配制完毕后瞬时离心以使液体沉至管底。
三、PCR反应:
降落PCR法(Touchdown PCR):94℃变性2分钟;首循环:94℃变性30秒,68℃退火30秒,72℃延伸45秒;从第二到八个循环开始,每循环退火温度下降1℃,其余不变;从第九个循环开始,反应条件固定为:94℃变性30秒,60℃退火30秒,72℃延伸45秒,循环32次;循环结束后,在72℃延伸7分钟,保持在4℃。