K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂

价格
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型号
BJ-01X8981

品牌
邦景

所在地
暂无

更新时间
2023-05-26 09:56:42

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    培养操作步骤:

    1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;

    2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);

    3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;

    4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;

    5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

    产品属性:

    中文名称:K-252B(蛋白激酶仰制剂) ,生化试剂

    英文名称:K-252B

    产品规格:1mg

    发货周期:1~3天


     

    CAS号:99570-78-2

    MDL号:MFCD00132117

    EINECS号:999-999-2

    分子量:453.45

    储存条件:冷冻(-20℃)


    我们科研实验室:
    细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)
    实验报告:

    一、分离与培养:

    1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,*将组织剪成1mm3左右大小;

    2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

    3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;

    4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

    5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

    二、免疫荧光鉴定:

    1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

    2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

    4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞*;

    5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

    6、用PBS冲洗3次,每次10min,*在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

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    TBX2/T-box2  栓素B2抗体(一种新发现的抑基因) 规格: 0.2ml 半胱胺盐盐 Cysteamine Hydrochloride

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    TMPRSS4  膜型丝氨蛋白酶2抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-dog IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗狗IgG 规格: 0.1ml 酰胺 Acetazolamide

    Vesicle docking protein p115  囊泡对接蛋白p115抗体 0.2ml 1-1-Naphthol

    FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X  母细胞瘤基因X染色体蛋白抗体 规格: 0.2ml 4--6,7-亚基二氧代香豆素(>99.0 %(GC)) 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin

     

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