腮腺炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

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型号
50次

品牌
博湖

所在地
暂无

更新时间
2023-05-26 09:57:06

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    储存条件:

    公司产品仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法

    1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

    2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。

    3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。

    4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。

    5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    产品属性:
    产品名称:腮腺炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

    货号:BH-P063499

    规格:50次

    分类:荧光定量PCR试剂盒

    储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。

    运输:低温、避光,快递免费送货上门。

    石蜡切片(FFPE)核酸提取试剂盒说明书

    实验过程:
    一、试剂准备
    1. DNA模板
    2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步骤
    1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    ddH2O至               50 μl
    PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
    2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,总线后在72℃ 保温7min。
    3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
    4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
    三、注意事项
    1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。总线好设立一个的PCR实验室。
    2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
    3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
    4.PCR试剂配制应使用总线高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
    5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
    6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
    7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

    使用方法:
    一、稀释标准曲线样品(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。
    1. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
    2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 模板稀释液,*用带芯枪头,下同)。
    3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照(浓度为 1×10E8 拷贝/μL,试剂盒提供),充分震荡 1 分钟,得 1×10E7 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
    4. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
    5. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的标准曲线样品。放冰上待用。
    6. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
    二、样品 DNA 的制备
    7. 用自选方法纯化样品的 DNA,本产品跟市场上绝大多数核酸纯化产品兼容。
    8. 如果有 N 个样品,则需要进行 N+2 个样品提取,多出的一个用作样品制备阳性对照管、另一个用作样品制备阴性对照管。
    三、设置 qPCR 反应(20μL 体系,在样品制备室进行)
    9. 如果做定量分析并且只做 1 次重复,则标记 N+9 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),6 个用于标准曲线。如果做定性分析,并且只做 1 次重复,则标记 N+4 个 PCR 管,其中 N+2 个用于上步得到的 N+2 个样品,1 个用于 PCR 阴性对照(用水做模板),1 个用于PCR 阳性对照。皮肤T-关联抗原(CTAGE)酶联免疫试剂盒1,3-二氯烷 standard for GC, ≥99.5% (GC)二氧化硅 SP基二甲基氯硅烷(>99.0%(GC))

    皮敌菌素(DCD)酶联免疫试剂盒二乙氨基乙基纤维素 TLC二氧化硅 99.99% ls basis,粒径:2μm二甲基异基氯硅烷(>90.0%(GC))

    皮层肌动蛋白(CTTN)酶联免疫试剂盒二乙氨基乙基纤维素N-300 TLC二氧化硅标准溶液 1000μg/ml1-(二甲基异基硅基)咪唑(>98.0%(T))

    配子发育蛋白(GGN)酶联免疫试剂盒二乙二 Standard for GC, ≥99.5% (GC)二氧化硅标准溶液 100mg/L,基体:0.05%Na2CO3(溴甲基)二甲基氯硅烷(>95.0%(GC))

    配对框基因9(PAX9)酶联免疫试剂盒N,N-二甲基对苯二 99%,用于过氧化物酶试验亲水性气相纳米二氧化硅Hydr 99.8%,比表面积(BET):200m2/g;粒1,3-双(氯甲基)四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))

    胚胎植入前蛋白3(PREI3)酶联免疫试剂盒N,N-二甲基对苯二 AR,环保试剂,96%二氧化硅 1-3mm 颗粒,99.999%氯代(氯甲基)二甲基硅烷(>98.0%(GC))

    旁血小板溶蛋白(PPL)酶联免疫试剂盒三十二烷 98%纳米二氧化硅 99.5%,50±5nm烯基二甲基氯硅烷(>96.0%(GC))

    排卵蛋白(LAYN)酶联免疫试剂盒二苯氨基脲 AR二氧化硅 99.999%,直径2mm,高度10mm,圆柱体状1,3-二苯基四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))

    帕金森氏病蛋白2(PARK2)酶联免疫试剂盒乙 for HPLC, >99.0%(GC),含2%乙作稳定剂气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):200m2/g;氯化物:0.01二氯二乙基硅烷(>90.0%(GC))

    耦合因子6(CF6)酶联免疫试剂盒二甲基黄 indicator气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):300m2/g;粒径:7-40n五氟苯基二甲基氯硅烷(>95.0%(GC))

    偶对蛋白(SYMPK)酶联免疫试剂盒砷试剂 AR,99.0%气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):170m2/g;粒径:7-40n五氟苯二甲硅基二乙(>98.0%(GC)(T))

    扭转原肠胚形成同源物1(TWSG1)酶联免疫试剂盒1,2-二氯乙烷 standard for GC,>99.9%(GC)气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):120m2/g;粒径:7-40nN,N-二甲酰二乙基缩(>95.0%(GC))

    牛磺酸转运蛋白(TAUT)酶联免疫试剂盒1,3-二氨基-4-(5-溴-2-吡啶偶氮)苯 AR疏水气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):230m2/g;;粒径:7-40nN,N-二甲酰二缩(>90.0%(T))

    牛痘相关激酶1(VRK1)酶联免疫试剂盒2-(3,5-二溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚 AR气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积(BET):100m2/g;粒径:7-40nN,N-二甲酰二丁缩(>98.0%(GC)(T))

    凝血因子Ⅻ(F12)酶联免疫试剂盒二乙氨基乙基纤维素-1 TLC二氧化硅 99.5%,30±5nmN,N-二甲酰-二叔丁缩(>98.0%(N))

    凝血因子Ⅺ(F11)酶联免疫试剂盒二甲基黄 分析标准品,≥98.0% (HPLC)二氧化硅 99.5%,15±5nmN,N-二甲酰二甲缩(0.5mL×10)
    腮腺炎病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒Tiagabine hydrochloride

    145821-59-6

    中文名: 盐酸噻加宾

    别 名:

    分子式:C20H26ClNO2S2

    性状:Powder

    纯度:98.0%

    Felodipine

    72509-76-3

    中文名: 非洛地平

    别 名:

    分子式:C18H19Cl2NO4

    性状:Yellow powder

    纯度:98.0%

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