HK-2细胞代理

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HK-2细胞代理

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闵行区

更新时间
2024-03-15 14:52:07

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    HK-2细胞代理产品介绍
    HK-2细胞代理由上海乾思生物科技有限公司现货销售HK-2细胞代理,HK-2细胞代理--  。上海乾思生物公司细胞近3000种,来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制,在大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。为您HK-2细胞代理-- 外,还有更多相关实验产品,标准品,细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。
     
    市面上的HK-2细胞代理-- “李鬼”细胞荼毒科研,科学家指出被污染细胞系使生物医学遭受严重损失,细胞的身份至关重要。
    二、购买上海乾思生物HK-2细胞代理-- 注意事项--(乾思生物)发布
    2.1 客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
    收到HK-2细胞代理-- 未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
    2.2 如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
    注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
    2.3 细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
    (1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
    (2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
    (3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
    (4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
    (5)视具体情况而定。
    2.4 细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
    (1)客户造成细胞污染,不重发;
    (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
    (3)细胞状态不好,未细胞培养前3天照片的,不重发;
    (4)细胞培养时经其它处理的,不重发;
    (5)细胞收到2天内,未告知,不重发;
    (6)视具体情况而定。
    三、HK-2细胞代理-- 细胞培养常用试剂及配制方法
    1、水细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.
    2、PBS (也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):主要用于 immune组化染色时组织或细胞的漂洗
    溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO4 0. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml,摇匀即成新配制的PBS溶液。用HCl或NaOH调PH到7.4。
    移入溶液瓶内待 :将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8磅 20分钟。注意高压 后要用 蒸馏水补充蒸发掉的水份。
    3、胰蛋白酶溶液
    胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为8.0、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
    称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于4℃内放置一夜。
    用注射滤器抽滤 :配好的胰酶溶液要在净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤  。然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。
    4、0.05%胰蛋白酶-0.02%EDTA溶液
    称取胰蛋白酶粉末(1:250) 0.05g,EDTA 0.02g,加入PBSA 100ml,0.22um微孔滤膜过滤  ,分装,于-20℃保存。
    5、青、链霉素溶液
    所用纯净水(双蒸水)需要15磅高压20分钟 。 具体操作均在净台内完成。青霉素是80万单位/瓶,用注射器加4ml 双蒸水。链霉素是100万单位/瓶,加5ml 双蒸水,即每毫升各为20万单位。 分装于-20℃保存。使用时溶入培养液中,使青链霉素的浓度终为100单位/ml。
    6、RPMI1640
    溶解、调PH值、定容:先将培养基粉剂加入培养液体积2/3的双蒸水中,并用双蒸水冲洗包装袋2-3次(冲洗液一并加入培养基中),充分搅拌至粉剂全部溶解,并按照包装说明添加一定的药品.然后用注射器向培养基中加入配制好的青链霉素液各0.5ml, 使青链霉素的浓度终各为100单位/ml。然后用二氧化碳或碳酸氢钠调PH到7.2左右。定容至1000ml,摇匀。
    安装蔡式滤器:安装时先装好支架,按规定放好滤膜,用螺丝将不锈钢滤器和支架连接好。然后卸下支架腿分别用布包好待 。
    抽滤:配制好的培养液通常用滤器过滤  。通常用蔡式滤器在净工作台内过滤。
    分装:将过滤好的培养液分装入小瓶内置于4℃冰箱内待用。
    使用前要向100ml培养液中加入1ml谷氨酰胺溶液(4℃时两周有效)。
    7、 血清的灭活
    细胞培养常用的是牛血清,新买来的血清要在56℃水浴中灭活30分钟后,再经过抽滤方可加入培养基中使用。
    8、HEPES溶液
    HEPES的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’- ethanesulfanic acid )。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。
    1mol/L HEPE缓冲液配制方法如下:
    准确称取HEPTS 238.3g,加入新鲜三蒸水定容至1L。0.22um微孔滤膜过滤  ,分装后4℃保存。
    注意:因为现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,所以可根据实际情况灵活配制,但是要保证培养液内HEPES的终浓度仍然为20m mol/L 。如:称取4.766克HEPES溶于20ml三蒸水中,过滤  后可完全(20ml)加入1L培养液中,或者每100ml培养液中加入2ml即可。
    9、谷氨酰胺
    合成培养基中都含有较大量的谷氨酰胺,其作用非常重要,细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质,谷氨酰胺缺乏要导致细胞生长不佳甚至死亡。在配制各种培养液中都应该补加一定量的谷氨酰胺。由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4℃下放置1周可分解50%,故应单独配制,置于-20℃冰箱中保存,用前加入培养液。加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,应重新加入原来的谷氨酰胺。
    一般培养液中谷氨酰胺的含量为1~4mmol/L。可以配制200mmol/L谷氨酰胺液贮存,用时加入培养液。配制方法为,谷氨酰胺2.922g溶于三蒸水加至100ml即配成200mmol/L的溶液,充分搅拌溶解后,过滤  ,分装小瓶,-20℃保存,使用时可向100ml培养液中加入1ml谷氨酰胺溶液。
    10、肝素溶液的配制
    含有肝素的培养液可以使内皮细胞纯度提高,肝素加入全培养液中终浓度为50ug/ml。因为现在市售的多为肝素钠,包装为约为0.56克/瓶,配制时,可将其溶于100ml三蒸水中,定容,放置一夜,然后过滤  ,分装小瓶,保存温度为??℃ 。使用时,向100ml培养液中加入1ml(   可加入0.9ml)即可。
    11、Ⅰ型胶原酶
    0.1%Ⅰ型胶原酶溶液同胰蛋白酶一样配制和  。注意:因为Ⅰ型胶原酶分子颗粒比胰酶大,不容易过滤,因此可以用蔡式滤器过滤  。分装入10ml小瓶-20℃保存。
    12、明胶溶液
    因为明胶难于过滤,所以配制0.1%明胶溶液必须用无菌的PBS配制。所以制备过程中必须要注意无菌操作。的问题是如何无菌准确称量0.1克(配成100ml溶液)—即解决无菌分装药品的问题。其次要注意即使是01.的溶液,明胶也难溶,因此要充分摇匀,放置一夜,然后无菌操作分装入50ml小瓶中,4℃保存。
    13、Hanks液
          称取KH2PO4 0.06g,Nacl 8.0g,NaHCO3 0.35g,KCl 0.4g,葡萄糖1.0g,Na2HPO4.H2O  0.06g,加H2O至 1000ml
    注:Hanks液可以高压 。分装于4℃下保存。
    14、D-hanks液
    1液:NaCL:8.00g/L,KCL : 0.04g/L,Na2HPO4.2H2O:0.06g/L,KH2PO4:0.06g/L,配500毫升;
    2液:NaHCO3:0.35g/L,配100毫升;
    3液:酚红:0.02g,用数滴NaHCO3溶解酚红
    将2,3液移入1液中。定容到1000毫升 PH值是7.4左右。分装于4℃下保存。
    关于细胞培养还有很多问题需要解答,怎么办?
    ,为你排忧解难!
    四、HK-2细胞代理-- 售后服务政策
    Acris、 abcam、cst、Biorbyt、santa、Novus、sigma、lifespan、NEB、roche、ABI、R&D millipore、BD、Qiagen Cayman、Jackson Life、GeneTex、Bio-Rad DSHB、tocris、peprotech 等;部分产品现货,低比价,另常备、Trizol、DMSO、lipo2000、lipo3000、SC-2004、SC-2005常备现货 ;货期短,价格优,售后齐全。
    HK-2细胞代理-- 污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。
    需要客户HK-2细胞代理-- 细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表。
    如用户收到细胞8-30天之内,因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将优惠价重新一株原细胞
    HK-2细胞代理-- 质量可靠,售后有保障
    我库细胞近3000种,来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制。
    冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
    由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解HK-2细胞代理-- 相关细胞价格及详细资料请老师告诉我们,对您造成的不便还请见谅!


    以上信息由企业自行提供,信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责,仪器仪表交易网对此不承担任何保证责任。
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